1. 什么是数字PCR
数字PCR核心在于微滴化处理,每个微滴都是独立的PCR反应,利用微滴荧光信号,得到靶分子的拷贝数及浓度,广泛应用于核酸的绝对定量。
图1 数字PCR检测技术原理
2. 数字PCR能做什么
目前,数字PCR在病原体诊断和疗效监测方面有很好的临床应用价值,靶向细菌、真菌、病毒、耐药基因,具备高灵敏度、高特异性、绝对定量、高耐受性等优势,为感染性疾病提供早期、快速、准确的诊断结果,同时也可反映抗菌药物疗效。
表1 数字PCR靶向检测常见病原体和耐药基因
3. 数字PCR怎么做
数字PCR检测的是游离DNA,采血管为游离DNA管,采样5-10ml。检测过程包括核酸提取、芯片制备、PCR扩增、芯片阅读、结果分析,实现全程基本自动化、封闭式操作,避免污染。数字PCR无需培养,节省时间;高灵敏度,提高检出率;多色荧光检测,一管血可检测23个靶标,节省宝贵样本,帮助解决“检出率低”和“检测周期长”两大痛点,达到早期诊断、疗效监测的目的。
图2 数字PCR检测全流程